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走進(jìn)實驗室:「生物反應(yīng)器」的參數(shù)秘密 時間:2024.01.22
在實驗室設(shè)備中,生物反應(yīng)器是一款無論是性能還是應(yīng)用范圍都較為全面的儀器設(shè)備,對于科研人員的實驗都大有助益。但想要利用得力助手來幫助實驗生產(chǎn),首先就要對你的“助手”有深入全面的了解,掌握它在生化反應(yīng)時各數(shù)值的變化信息。
 

一、檢測的參數(shù)類型

物理參數(shù)包括溫度、罐壓、液位、通氣流量、攪拌轉(zhuǎn)速等等,化學(xué)、生物參數(shù)通常涉及pH、DO、溶解CO2濃度、目標(biāo)產(chǎn)物濃度,以及細(xì)胞濃度等。
 

二、檢測儀器及原理

生物反應(yīng)器對于各參數(shù)的檢測分為在線檢測(On-line)和離線檢測(Off-line),在線主要是利用各類傳感器直接在反應(yīng)器中測得,而離線則是需要從反應(yīng)器中取樣,再用其他檢測儀器或方法來進(jìn)行測量。綜合考慮,在線檢測是首選途徑。
生物反應(yīng)器檢測儀器基本構(gòu)成
 
1.物理參數(shù)
從物理角度來看,生物反應(yīng)器中較為常見的參數(shù)是溫度、攪拌轉(zhuǎn)速和通氣流量。
溫度的監(jiān)測對于生物反應(yīng)的控制至關(guān)重要。常見的溫度檢測方法包括水銀玻璃溫度計、熱電偶、熱敏電阻和熱電阻溫度計等。通常會采用熱電阻來檢測系統(tǒng)中的溫度。熱電阻利用金屬導(dǎo)體或半導(dǎo)體的電阻隨溫度的變化而變化的原理,通過測量電阻值的變化來確定溫度。目前普遍使用的熱電阻是鉑電阻和銅電阻,其中鉑電阻精度高、穩(wěn)定性好且性能可靠;銅電阻超過100 ℃時易被氧化。
熱電阻示意圖
 
2.化學(xué)參數(shù)
從化學(xué)角度來看,作為生物反應(yīng)器關(guān)鍵參數(shù)之一,pH的變化會直接影響到生物過程的進(jìn)行。pH檢測方法主要包括化學(xué)分析法、試紙法和電極電位法, 而為保證精準(zhǔn)測定,通常采用電極電位法。
pH控制
基于電極法原理而構(gòu)成的測量裝置就是實驗室和工業(yè)上所使用的pH計,它是由發(fā)送器(電極)與測量儀器(電位差或高阻轉(zhuǎn)換器等)所組成。發(fā)送器所測得的信號就是指示電極、參比電極和被測溶液形成的原電池的電動勢,通過測量即可計算出被測溶液的pH。

另一關(guān)鍵參數(shù)就是DO,也就是我們常說的溶解氧。DO對于生物反應(yīng)器的有效工作至關(guān)重要,DO過低會影響細(xì)胞生長以及營養(yǎng)吸收,嚴(yán)重會導(dǎo)致實驗失敗。對于DO的檢測一般有碘量法、極譜法和LDO法。

碘量法的步驟較為復(fù)雜,且檢測時間也相對比較長。如遇到情況復(fù)雜的含有大量藻類的液體,水中氧氣因光合作用而增加飽和,測量過程困難,結(jié)果也不夠精準(zhǔn),因此此種方法比較少見。LDO法測定迅速便捷,但儀器價格高??紤]各方因素,極譜法的使用較廣。極譜法使用的DO電極,其原理是在兩極之間施加恒定電壓,電子從陰極流向陽極,產(chǎn)生擴(kuò)散電流;在一定溫度下,擴(kuò)散電流與溶解氧濃度成正比;在不同的DO濃度下,電流強度也不同,儀器自動將電流表讀數(shù)轉(zhuǎn)換成溶解氧濃度,最終計算得出DO值。但由于電解質(zhì)參與了反應(yīng),電極的膜極易產(chǎn)生污垢,為了防止電解液被污染影響測量精度,需要定期更換電解液。(更換電解液的方法可參考往期文章。
 
3.生物參數(shù)
從生物角度來看,細(xì)胞濃度作為一個重要的狀態(tài)參數(shù),如果失控將會嚴(yán)重影響產(chǎn)物的合成。普通的離線檢測方法有細(xì)胞干重法、顯微鏡計數(shù)法等,在線檢測方法最常用的是濁度法間接檢測,其他還有熒光法、黏度、阻抗和產(chǎn)熱等間接檢測方法。以濁度法為例,濁度大小由溶液中含有的微量不溶性懸浮物質(zhì)、膠體物質(zhì)的多少決定,在培養(yǎng)過程中檢測培養(yǎng)基的濁度,能及時反映低濃度單細(xì)胞的生長狀況。
細(xì)胞濃度在線檢測濁度計
 
各種方法和儀器的應(yīng)用使得我們能夠準(zhǔn)確地獲得參數(shù)的信息,從而優(yōu)化生物反應(yīng)器的操作,提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。在未來的生物工程領(lǐng)域,隨著科技的進(jìn)步和儀器的不斷創(chuàng)新,我們相信生物反應(yīng)器的參數(shù)檢測技術(shù)將會得到更加精確和高效的發(fā)展。這將為生物過程的控制和優(yōu)化提供更多的可能性,促進(jìn)生物技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展,為人類的生活帶來更多的福祉。

 

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